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Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒#CA001

Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒
是否有货: yes
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产品详情

产品名称Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒

基因/蛋白名称Annexin V

应用详情

1、 离心收集悬浮细胞。离心机 300-500g,2-8°C,离心时间 5min,弃培养基。(贴壁细胞用不含 EDTA 的胰酶 消化后离心,收集细胞。胰酶消化时间不宜过长,以防引起假阳性)。

2、 用冷 PBS 洗涤细胞两次。(300g,2-8°C,离心时间 5min 收集细胞)。

3、 用 400ul 1X Annexin V 结合液悬浮细胞,浓度大约为 1 X 106 cells/ml。

4、 在细胞悬浮液中加入 5ul Annexin V-FITC 染色液,轻轻混匀后于 2-8°C 避光条件下孵育 15 分钟。

5、 加入 5-10ul PI 染色液后轻轻混匀于 2-8°C 避光条件下孵育 5 分钟。

6、 立即用流式细胞仪或荧光显微镜检测。

产品描述

 经处理过的细胞此时可以在流式细胞仪上分析。激发波长为 488nm。 按照常规的流式凋亡检测的操作即可。 Annexin V-FITC 的绿色荧光发射波长 530nm,信号可以通过 FL1(FITC 接收器)通道检测;PI 红色荧光在 620nm,通过 FL2(Propidium iodide 接收器)通道或 FL3 通道检测。 上机检测前,需用待测细胞制备三个质控样本来设定流式细胞仪的荧光补偿和设置十字门的范围: ① 没有染色的细胞; ② 仅用 Annexin V-FITC 染色的细胞; ③ 仅用 PI 染色的细胞.

背景

细胞凋亡是细胞的基本特征之一,它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定和一些疾病发生过程等方面 起着十分重要的作用。在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期, 细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。在体内,巨噬细胞可以识别翻转到细胞膜表面的 PS 从而将 这些程序性死亡的细胞清除,因此凋亡过程中并不伴随局部的炎症反应,而在细胞坏死的过程中则常常伴随着炎症 反应。 AnnexinⅤ是一种分子量为 35-36kD 的 Ca2+ 依赖性磷脂结合蛋白,能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的 PS 高亲和 力特异性结合。PS 外翻发生在细胞核破裂,DNA 片段化以及凋亡相关蛋白出现之前,这使得 Annexin V 与 PS 的 结合成为凋亡早期的一种重要检测标志事件。

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5

注释

应用

  • WB免疫印迹
  • IHC免疫组化
  • IF免疫荧光
  • ICC免疫细胞化学
  • FC流式细胞
  • IP免疫沉淀
  • E酶联免疫吸附法
  • DB免疫斑点法
  • ChIP染色质免疫沉淀
  • GICA胶体金免疫层析法
  • NC阴性对照

种属反应性

  • Hu
  • Ms小鼠
  • Rt大鼠
  • Dm果蝇
  • C线虫
  • Mk
  • Rb
  • B
  • D
  • P
  • Hm仓鼠
  • ChHm中国仓鼠
  • Chk

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