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Signalway Antibody精选丨PAK1/PAK2/PAK3磷酸化抗体,敲除验证,高效可靠!

2025-08-06

       PAK(p21-activated kinase) 是一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,是Cdc42 和 Rac的直接下游效应器,在细胞信号转导、细胞骨架重组、细胞增殖和存活等过程中发挥关键作用。

       PAK家族在哺乳动物中,根据结构和功能分为两组:

Group I PAKs: PAK1,PAK2,PAK3

Group II PAKs:PAK4,PAK5,PAK6

       PAK1 (S144)、PAK2 (S141)、PAK3 (S139) 这三个位点位于各自激酶域的激活环(activation loop/T-loop)上,它们的磷酸化是 I 组 PAK 激酶活化的核心分子开关,是PAK激活过程中的关键步骤。PAK 的 AID 结构域紧密结合激酶结构域,阻止其接触底物,激酶处于关闭状态。当活化的 Cdc42 或 Rac 结合到 PAK 的 CRIB 结构域时,会引起 PAK 构象的显著变化。这种构象变化导致 AID 结构域暴露并发生自身磷酸化或通过其他激酶磷酸化,其中 S144/S141/S139 是最关键、最先发生的磷酸化位点之一。另外,S144/S141/S139 位点的磷酸化在 AID 结构域上引入了一个带负电荷的磷酸基团,这个负电荷会破坏 AID 与激酶结构域之间的静电相互作用和氢键网络,导致 AID 结构域从激酶结构域上解离下来。AID 解离后,激酶结构域完全暴露出来,可以自由地结合 ATP 和底物蛋白,激酶活性被激活。这一系列动态调控直接影响细胞行为,尤其在癌症中具有重要病理意义,是潜在的诊断标志物和治疗靶点。

       由于 S144/S141/S139 的磷酸化与 PAK 的激酶活性高度正相关,使用特异性抗体进行 Western Blot 或免疫荧光等检测该位点的磷酸化水平是研究 I 组 PAK 激活状态的最常用和最可靠的实验方法。

       Signalway Antibody重磅推荐:PAK1/PAK2/PAK3(Phospho-S144/S141/S139) Rabbit mAb#13363


#产品优势#

➤ 重组兔单抗,高特异性与灵敏度且批间一致。

➤ 经过knockout 验证,确保抗体特异性与可靠性。

➤ 多种人、小鼠、大鼠细胞和组织样本验证,适用性广泛。

➤ 货期快,性价比高。


1.png

WB验证结果显示不同种属下的细胞或组织样本条带位置均正确且清晰,无非特异性条带。

All lanes : PAK1/PAK2/PAK3(Phospho-S144/S141/S139) Rabbit mAb at 1/1k dilution

Lane 1 : NIH/3T3 whole cell lysates 
Lane 2 : Hela whole cell lysates 
Lane 3 : C6 whole cell lysates 
Lane 4 : Mouse lung lysates 
Lysates/proteins at 20 µg per lane.
Secondary
All lanes : Goat Anti-Rabbit IgG H&L (HRP) at 1/20000 dilution
Predicted band size: 61 kDa 
Observed band size: 65 kDa
Exposure time: 7 second


2.png

WB验证结果显示敲除与野生型样本趋势明显,表现出抗体的高特异性。刺激过的样本信号强烈,表现出抗体的磷酸化特异性。

All lanes : PAK1/PAK2/PAK3(Phospho-S144/S141/S139) Rabbit mAb at 1/1k dilution
Lane 1 : C6 treated with 100ng/mL EGF for 30 minutes whole cell lysates 
Lane 2 : Wild-type HAP1 cell lysate
Lane 3 : PAK1 knockout HAP1 cell lysate
Lane 4 : PAK2 knockout HAP1 cell lysate
Lane 5 : Hela treated with 100ng/mL EGF for 30 minutes whole cell lysates 
Lane 6 : MCF7 treated with 100ng/mL EGF for 30 minutes whole cell lysates
Lysates/proteins at 20 µg per lane.
Secondary
All lanes : Goat Anti-Rabbit IgG H&L (HRP) at 1/20000 dilution
Predicted band size: 61 kDa 
Observed band size: 65 kDa
Exposure time: 3 seconds


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