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ELISA实验步骤详解

2025-01-13

样本处理方法:

组织样本:切割样本后,称取重量。加入一定量预冷的 PBS ,缓冲液中可加入 1 μ g/L 蛋白酶抑制剂或50 U/mL的Aprotinin( 抑肽酶)。用手工或匀浆器将样本匀浆充分。1000 ×g离心20 分钟左右。收集上清并分装,置于-20℃或-70℃保存。如有必要,可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测,其余冷冻备用。没有针对所有样本类型的最佳方法,客户参考报道文献的处理方法进行样本处理

细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。1000 ×g离心20分钟左右,收集上清。检测细胞内成分,用PBS细胞悬液稀释后,使细胞浓度达到约100万/ mL。 通过超声处理,使细胞膜受损并释放细胞内成分,以1000×g离心20分钟,收集上清液。 保存过程中如果形成沉淀,应再次离心

血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8℃ 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

 





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