产品详情
产品名称Cell Cycle Detection Kit 细胞周期检测试剂盒
应用详情
1、收集样本细胞，细胞数量在 10X105个以内。
2、 用冷 PBS 洗涤细胞两次。
3、 75％冰冻乙醇-20℃固定 1 小时或 4℃固定过夜。
4、 用冷 PBS 洗涤细胞一次。
5、 用 200-500ul 冷 PBS 重悬细胞。
6、 加入 Rnase A 溶液 20ul 37℃水浴 30 分钟。
7、 400 目筛网过滤。
8、 加入 400ul PI 染液，轻轻混匀后 4℃避光孵育 30 分钟-1 小时。
9、 流式检测结果。最大激发波长为 488nm。
细胞周期检测试剂盒是利用细胞内 DNA 能够和荧光染料结合的特性，细胞各个时期其 DNA 含量不同从而结合 的荧光染料不同，流式细胞仪检测的荧光强度也不一样来检测细胞周期。 细胞发生凋亡时，由于胞浆和染色质浓缩、核裂解，产生凋亡小体，使细胞的光散射性质发生变化。在细胞凋 亡的早期，细胞对前向角光散射的能力显著降低，对 90°角光散射的能力增加或没有变化。在细胞凋亡的晚期，前 向角和 90°角光散射的信号均降低。因此可通过流式细胞仪测定细胞光散射的变化观察凋亡细胞。用 PI 对细胞进 行染色，凋亡细胞由于总 DNA 量降低，于正常 G0/G1 细胞群前出现一 DNA 低染细胞群，即 G1 峰前出现亚二倍体 峰（sub-G1），细胞凋亡群。
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