使用方法:
1、每 500ul 抽提液 A 中加入 2ul 蛋白酶抑制剂混合物,充分混匀后置冰上备用。
2、取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的 200mg 植物组织样本剪碎,置于研钵中用液氮研磨。(没有液氮也可直接
置冰上研磨即可)
3、研磨后加入 500ul 提取液,混匀后于一个预冷的干净离心管中在冰上静置 2-3 小时。
4、将提取液在低温下 12000×g 离心 5 分钟,取上清。
5、在上清中加入 10ul 抽提液 B,充分混匀。
6、在 37℃水浴 10 分钟。
7、在 37℃ 1000×g 离心 5 分钟。
7、小心吸取管底部大约 50ul 液体。
8、用稀释液稀释该溶液,即得膜蛋白样品。该样品可以用 Bradford 或 BCA 方法进行定量,调整相应的浓度用
于下游实验。