1、 染色缓冲液的配制:根据样品数按下列比例配制染色缓冲液。 取 100μL 试剂 C 加 900μl 无菌去离子水稀释,
混匀即成染色缓冲液。
2、 收集样本细胞,细胞数量在 10X105 个以内。
3、 用 PBS 洗涤细胞两次。
4、 用 500μl 染色缓冲液将细胞重悬。
5、 加入 5ul AO 染色液 A。
6、 加入 5ul EB 染色液 B。
7、 轻轻混匀后 4℃避光孵育 10-20 分钟。
8、 用 PBS 洗涤细胞。
9、 用荧光显微镜或流式细胞仪检测结果。AO-DNA 复合物的最大激发波长为 488nm,最大发射波长为 515nm,EB-DNA
复合物的最大激发和最大发射波长分别为 518nm 和 605nm。