1、 染色缓冲液的配制:
根据样品数按下列比例配制染色工作液。
取 100μL 试剂 B 加 900μl 无菌去离子水稀释,混匀即成 1X 稀释液。
每 500ul 的 1X 稀释液中加入 5ul EB 染色液,混匀即成染色工作液。
2、 收集样本细胞。
3、 用 PBS 洗涤细胞两次。
4、 用 500μl 染色工作液将细胞重悬。
5、 轻轻混匀后 4℃避光孵育 10-15 分钟。
6、 用 PBS 洗涤细胞。
7、 用荧光显微镜或流式细胞仪检测结果。EB-DNA 复合物的最大激发和最大发射波长分别为 518nm 和 605nm。