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产品名称胞浆蛋白提取试剂盒
1. 取 5-10×106 个细胞,在 4℃,500×g 条件下离心 2-3 分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞。 2. 用冷 PBS 洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。 3. 每 20ul 细胞压积中加入 200μl 冷的胞浆蛋白提取液,2ul 蛋白酶抑制剂混合物,高速涡旋振荡 15 秒, 置冰上 10 分钟。 4. 再次高速涡旋振荡 5 秒,然后在 4℃,16000×g 条件下离心 5 分钟。 5. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到胞浆蛋白,请置于冰上或-80℃冰箱保存备用。 B. 组织蛋白提取 1. 取适量组织样本剪碎,加冷 PBS,用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体(或用液氮研磨),冰上静 置 5 分钟,小心将上清吸入另一预冷的干净离心管。 2. 在 4℃,500×g 条件下离心 2-3 分钟,弃上清。 3. 按照细胞蛋白的提取方法的第 3 步骤往下操作即可。 上述蛋白提取物请分装后于-80℃冰箱保存备用。
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